新型补骨脂酚氨基胍衍生物诱导人三阴性乳腺癌细胞凋亡

作者：Zhenhai Zhang, Jing Zhu, Jian'an Wang, Jie Chen, Y. Pang, Cheng‐Zhu Wu · 发表于：Zhejiang da xue xue bao. Yi xue ban = Journal of Zhejiang University. Medical sciences · 年份：2024 · DOI：10.3724/zdxbyxb-2024-0070 · 研究领域：Medicine

目的 合成新型补骨脂酚氨基胍衍生物，并探讨其对人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞死亡的影响。 方法 以补骨脂酚为起始化合物，通过甲酰化和席夫碱反应获得补骨脂酚衍生物1、2，并经氢谱、碳谱和高分辨质谱鉴定其结构；用噻唑蓝（MTT）法检测补骨脂酚及其衍生物对细胞存活率的影响；利用荧光显微镜、Anexxin V/PI双染结合流式细胞术法检测补骨脂酚及其衍生物对MDA-MB-231细胞凋亡的影响；蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白的表达；JC-1试剂盒检测细胞线粒体膜电位；DCFH-DA法检测细胞内的活性氧水平。 结果 根据波谱数据的分析，本研究合成获得1个新结构的补骨脂酚氨基胍衍生物，其化学名为2-｛（E）-5- ［（S，E）-3，7-dimethyl-3-vinylocta-1，6-dien-1-yl］-2-hydroxybenzylidene｝ hydrazine-1-carboximidamide（衍生物2）。MTT法结果显示，补骨脂酚及其衍生物对MDA-MB-231细胞均表现出一定的细胞毒性，其中衍生物2对MDA-MB-231细胞显示较强的细胞毒性，其作用24、48、72 h的IC50值分别为（13.11±1.09）、（6.91±1.78）和（2.23±1.32）μmol/L，但对小鼠正常肝细胞AML-12毒性较低，作用72 h的IC50值为（31.23±1.58）μmol/L。荧光显微镜下观察和流式细胞术检测结果显示，衍生物2诱导乳腺癌细胞凋亡，且呈浓度依赖性。进一步研究发现，衍生物2作用后的MDA-MB-231细胞中Bax/Bcl-2比值增加，细胞色素C蛋白表达水平上调，胱天蛋白酶3激活，线粒体膜电位下降、细胞内活性氧水平显著增高。 结论 新型补骨脂酚氨基胍衍生物可诱导MDA-MB-231细胞发生凋亡，且对正常肝细胞的毒性较小，可作为抗三阴性乳腺癌的先导化合物。