脱氧核酶对肝癌细胞AFPmRNA表达的影响

作者：储秋, Su Luo, 杨春梅 · 发表于：DOAJ (DOAJ: Directory of Open Access Journals) · 年份：2007 · 研究领域：Ferroptosis and cancer prognosis、Kruppel-like factors research、Peroxisome Proliferator-Activated Receptors

目的本研究针对AFPmRNA（甲胎蛋白mRNA）设计脱氧核酶,观察其切割AFPmRNA的有效性,探索脱氧核酶在肝癌基因治疗的可能性。方法体外转录AFPmRNA底物,设计并合成DZ（脱氧核酶）、DZs（硫代修饰脱氧核酶,序列同DZ,但两侧各有两个脱氧核苷酸进行了硫代修饰）、ASO（反义寡聚脱氧核苷酸）、无关DZ对照。体外切割AF-PmRNA;经转染试剂将脱氧核酶转染入肝癌细胞HepG2,利用RT-PCR法检测AFPmRNA水平的变化;免疫细胞化学及图像分析系统检测AFP蛋白质表达情况;MTT法初步估计肝癌细胞的生长效应。结果DZ与DZs在体外均可切割AFPmRNA底物;经转染DZ、DZs的细胞均下降AFPmRNA的水平,而且DZs的作用更强;经转染DZ与DZs的细胞均下降AFP的表达,ASO也略下降AFP的表达;DZ、DZs有抑制细胞生长的作用。结论本实验设计的脱氧核酶能在细胞外有效切割AFPmRNA;在细胞内也能切割AFPmRNA、抑制AFP的表达、抑制肝癌细胞的生长,为肝癌的基因治疗提供可能性。