^60Co-γ对Cl.beijerinckii原生质体的辐照诱变

作者：刘娅, 刘宏娟, 张建安, 程可可, 陈宗道 · 发表于：Acta Scientiarum Naturalium Universitatis Sunyatseni · 年份：2009 · 研究领域：Biopolymer Synthesis and Applications、Studies on Chitinases and Chitosanases、Probiotics and Fermented Foods

以产丁醇菌Cl.beijerinckii为出发菌株,将其原生质体化后进行^60Co-γ辐照诱变,筛选出了一株稳定高产的变异株。原生质体的最优制备条件为：将培养至15 h的细胞添加1 g.L^-1甘氨酸和0.3 U.L^-1青霉素培养2h后,37℃下,2×10^4U.L^-1溶菌酶作用8 h脱壁。经平板计数,原生质体形成率可达99.82%,原生质体再生率达10.12%。采用^60Co-γ射线进行辐照诱变,当辐照剂量率5 Gy.min^-1,辐照剂量为500 Gy时,原生质体致死率可达99.3%。经反复筛选,获得一株丁醇高产菌株R3,该菌具有较高的遗传稳定性。在P2半合成液体培养基中,37℃下静置培养72 h,总溶剂产量较出发菌株提高81.46%,丁醇产量提高85.41%。